产品货号：WB0102   产品含量：500mL、100mL、1g

产品简介：
聚丙烯酰胺凝胶电泳（Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis， 简称 SDS-PAGE），其作用原理在于聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶（ SDS-PAGE）；非变性聚丙烯酰胺凝胶，在电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开,主要用于分离蛋白质和寡核苷酸。

依科生物生产的 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒提供了配制 SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和双蒸水，即可配制 PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。而且，为使点样更清晰、更方便，我们采用独特的带有颜色的并经过环保处理的浓缩胶，不影响电泳、 染色以及转膜效果，为用户创造更加高效的操作条件。SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒不仅可用于SDS-PAGE 凝胶，也用于配制非变性(native)PAGE凝胶。

本试剂盒中把凝胶配制所需的缓冲试剂、 SDS 等预混合成分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液， 无需任何计算、 称量及复杂混合， 简化了凝胶配制的步骤。 分离胶缓冲液中含有 Tris pH8.8 及适量 TEMED 等。

保存条件：

6%分离胶预制液   500ml 4℃
8%分离胶预制液   500ml 4℃
10%分离胶预制液  500ml 4℃
12%分离胶预制液  500ml 4℃
15%分离胶预制液  500ml 4℃
5%浓缩胶预制液   100ml 4℃
过硫酸铵干粉     1g    RT

配胶说明：
1、先在过硫酸铵干粉中加入蒸馏水或去离子水(每克过硫酸铵需加水 10ml)配置成10%溶液，将溶液分装成小体积后冻存于-20℃，制备凝胶时融化后使用，用2-3次，剩余弃用。同时应尽量减少室温存放时间。10%过硫酸铵溶液现用现配，4℃有效期7-10天。

2、PAGE 的凝胶速度与温度以及APS、TEMED的用量密切相关，在其他条件不变的情况下可以通过改变APS的用量来控制PAGE凝胶的聚合速度，凝胶聚合过快不利于操作。
3、温度较低时，分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中的SDS可能会有析出，此时需水浴温育并在完全溶解和混匀后使用，不影响效果。
4、在凝胶配制过程中， 尤其是液体混匀步骤， 尽量避免气泡的产生。
5、在分离胶上层加双蒸水时要小心操作， 加水时速度不能太快。
6、为了您的安全和健康， 请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤(仅供参考) ：
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，再按照下面的表格配制SDS-PAGE 的分离胶。不同浓度SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围：

SDS-PAGE 分离胶浓度 最佳分离范围：
6%胶  50-150kD
8%胶  30-90kD
10%胶 20-80kD
12%胶 12-60kD
15%胶 10-40kD

本试剂盒提供 5 种 SDS-PAGE 分离胶浓度， 如需要单一浓度 SDS-PAGE 分离胶可向依科生物订购

制胶流程：
1) 参照凝胶模具说明书， 装配好凝胶模具。 按照您所需要的凝胶厚度及大小。吸取相应浓度的分离胶预制液适当体积。
2) 往步骤 1 中的预制液中按照 30-40μl/1ml 预制液的比例加入 10%的过硫酸铵溶液(APS) ， 混合均匀； (注： 环境温度尽量控制在 22-25℃) 调节 APS 用量使凝胶凝结时间控制在 30 分钟左右为宜。 如果温度低需要增加 APS 用量。
3) 将步骤 2 中溶液注入制胶玻璃板中适当高度， 然后轻轻加入适量双蒸水或乙醇覆盖于分离胶之上， 使凝胶表面保持平整并隔绝空气。
4) 静置 30-60 分钟， 待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后， 说明凝胶已聚合， 再等待几分钟后， 先倾去水层， 再用吸纸吸干。
5) 吸取适当体积浓缩胶预制液， 按照 8-10μl/1ml 预制液的比例加入 10%过硫酸铵溶液， 混合均匀后， 即可开始灌胶。
6) 将浓缩胶混合液注入制胶玻璃板中， 直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端，立刻插入齿梳， 避免产生气泡。
7) 静置 30-60 分钟， 待浓缩胶凝固后， 放入电泳液中(让电泳液漫过加样孔) ，轻轻的拨出梳子， 可防加样孔变形。